丝氨酸蛋白酶Rv2569c通过切割e -钙粘蛋白破坏上皮屏障，促进结核分枝杆菌的传播

2024年5月，《PLoS Pathog.》上发表论文：

“Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin”

“丝氨酸蛋白酶Rv2569c通过切割e -钙粘蛋白破坏上皮屏障，促进结核分枝杆菌的传播”

摘要：

上皮细胞是抵御病原体入侵的主要防线。然而，细菌病原体具有破坏这一屏障并促进细菌迁移的能力。然而，结核分枝杆菌(M.tb)在这一过程中所采用的具体分子机制尚不完全清楚。在这里，科研人员通过评估Rv2569c切割e -钙粘蛋白的能力来研究Rv2569c在结核分枝杆菌易位中的作用，e -钙粘蛋白是细胞-细胞粘附连接的重要组成部分，在细菌入侵期间被破坏。利用在大肠杆菌中表达并通过亲和层析纯化的重组Rv2569c，科研人员证明了Rv2569c具有细胞壁相关丝氨酸蛋白酶活性。此外，Rv2569c能够降解一系列蛋白质底物，包括酪蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白和e -钙粘蛋白。科研人员还确定了Rv2569c蛋白酶活性的最佳条件是温度为37℃，pH为9.0,MgCl2存在。为了研究Rv2569c在结核分枝杆菌中的功能，科研人员制备了Rv2569c的缺失突变体及其补充菌株，并将其用于感染A549细胞和小鼠。A549细胞感染实验结果显示，Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力，促进M.tb通过极化的A549上皮细胞层迁移。此外，体内感染实验表明，Rv2569c可以破坏E-cadherin，增强M.tb的定植，并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理损伤。总之，这些结果强烈表明结核分枝杆菌利用丝氨酸蛋白酶Rv2569c破坏上皮防御，并通过跨越上皮屏障促进其全身传播。

在该研究中，对A549细胞的体外培养，用到了Ausbian进口胎牛血清。