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公司新闻/正文
大肠杆菌O157选择性显色培养基（国标）
370 人阅读发布时间：2020-02-18 13:47
大肠杆菌O157选择性显色培养基（国标）
原理
肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌（VTEC/EHEC）。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素（3），但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的最常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。
该款显色培养基采用植物源蛋白胨，以取代动物源，避免了BSE/TSE风险。它基于 Rappaport 和Henigh（1）描述的配方而成。培养基含山梨醇和显色混合剂，不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌O157：H7 特异性裂解，产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。
培养基中的HiVeg水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性（2）。添加剂中的亚碲酸钾选择性抑制气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素抑制革兰阳性菌。月桂基硫酸钠抑制伴随的革兰阳性菌群。
培养基成分
组成 G/L
HiVeg水解物 5.000
酵母粉 3.000
山梨醇 7.000
合成离子活性剂1号 1.500
月桂基硫酸钠 0.100
显色混合剂 0.250
琼脂 15.000
最终pH（25°C） 6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸馏水，加热至沸使完全溶解。高压灭菌后，冷却至45-50℃，无菌加入复溶的添加剂（货号FD187，先用10ml蒸馏水复溶）。混匀并倾注平板。
质量控制
外观：奶油色至黄色均一自由粉末
成胶性: 牢固，与1.5%琼脂相当
制备好的培养基颜色和透明度：在平皿中为浅琥珀色，透明至轻微不透明凝胶
配比反应：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值为6.8±0.2
pH值要求：6.60-7.00
培养反应：
加入添加剂（货号FD187）后，在35-37°C培养18-24小时，观察如下：
参考文献
1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.
2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.
3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85
| 货号 | 名称 | 规格 | 存储 |
| MV1575A | HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified（需添加剂FD187） | 100G,500G | 2-8℃密闭 |
| FD187 | HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement | 5VL | 2-8℃ |
原理
肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌（VTEC/EHEC）。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素（3），但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的最常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。
该款显色培养基采用植物源蛋白胨，以取代动物源，避免了BSE/TSE风险。它基于 Rappaport 和Henigh（1）描述的配方而成。培养基含山梨醇和显色混合剂，不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌O157：H7 特异性裂解，产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。
培养基中的HiVeg水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性（2）。添加剂中的亚碲酸钾选择性抑制气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素抑制革兰阳性菌。月桂基硫酸钠抑制伴随的革兰阳性菌群。
培养基成分
组成 G/L
HiVeg水解物 5.000
酵母粉 3.000
山梨醇 7.000
合成离子活性剂1号 1.500
月桂基硫酸钠 0.100
显色混合剂 0.250
琼脂 15.000
最终pH（25°C） 6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸馏水，加热至沸使完全溶解。高压灭菌后，冷却至45-50℃，无菌加入复溶的添加剂（货号FD187，先用10ml蒸馏水复溶）。混匀并倾注平板。
质量控制
外观：奶油色至黄色均一自由粉末
成胶性: 牢固，与1.5%琼脂相当
制备好的培养基颜色和透明度：在平皿中为浅琥珀色，透明至轻微不透明凝胶
配比反应：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值为6.8±0.2
pH值要求：6.60-7.00
培养反应：
加入添加剂（货号FD187）后，在35-37°C培养18-24小时，观察如下：
| 菌种 | 接种量（CFU） | 生长状况 | 回收率 | 菌落颜色 |
| 大肠杆菌ATCC 25922 | 50-100 | 生长很少 | ≤10% | 蓝绿色 |
| 大肠杆菌O157:H7 NCTC 12900 | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 深紫-洋红色 |
| 肺炎克雷伯菌 ATCC 13883 |
50-100 | 一般-好 | 30-40% | 无色-淡紫色（黏液状） |
| 铜绿假单胞菌 ATCC 27853 |
50-100 | 一般-好 | 30-40% | 无色 |
| 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 |
≥103 | 抑制 | 0% | |
| 枯草芽孢杆菌 ATCC 6633 |
≥103 | 抑制 | 0% |
参考文献
1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.
2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.
3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85