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444 人阅读发布时间:2024-10-28 17:18
在实验室中,支原体污染是一个常见且难以察觉的问题,它不仅影响细胞培养的质量和实验结果的准确性,还可能对生物制品的安全性造成威胁。以下是一些有效的支原体污染处理方法:
1. 支原体检测:
• PCR法支原体检测,通过巢式PCR扩增支原体的16s和23s保守区,实现准确度和灵敏度的双重突破。
• qPCR法支原体检测,基于EP药典推荐的NAT法,快速、简便,3小时内可完成检测。
2. 支原体祛除:
• 使用支原体祛除试剂,这是一种混合制剂,通过抑制支原体生长所必需的蛋白合成来清除支原体,对细胞无毒性,操作简便,起效快,能去除大多数类型的支原体。
3. 支原体预防:
• 从源头预防,对新引进或原代分离的细胞进行支原体检测,阴性后方可进入无菌室培养。
• 实验操作流程规范,穿戴专用实验服,及时处理废弃物。
• 定期对无菌室进行消毒,并开启无菌空气过滤器及紫外灯杀菌。
• 使用支原体清除喷雾进行空间消毒,定期清洁和消毒培养设备,减少交叉感染的风险。
• 在水浴锅和培养箱的水源中加入消毒试剂,以减少支原体污染的可能性。
• 培养基和器材的无菌保证:
• 确保使用的培养基和器材无菌,对于已经发现支原体感染的实验室,不宜继续使用已开启的培养基。
通过上述方法,可以有效地检测、去除和预防支原体污染,保障实验室细胞培养的质量和实验结果的准确性。
市面上,支原体检测试剂盒牌子有点杂乱,检测结果的准确性差异也非常大。避免踩坑,大部分有经验的实验室会直接选择德国MB公司的盒子,准确率非常靠谱,价格也不贵——
一步法的常规PCR检测试剂盒。
德国MB的试剂,北京缔一生物是中国总代理,直接找他们能得到比较真实的价格,还有比较完善的技术支持。不过缺点是,他们订货一般需要先付款,如果做不到,就得具体讨论解决方案。