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非包膜病毒如何清除支原体污染？
307 人阅读发布时间：2024-03-23 23:58
细胞培养物被支原体污染是经常发生的。出于科学、安全和经济的原因，在基础研究、诊断和生物技术生产中，必须从受污染的细胞培养物中消除支原体。在细胞培养物中消除、灭活或抑制支原体最常用的方法是用抗生素治疗。然而，一般来说，抗生素治疗不能持久、成功地消除污染的支原体。此外，抗生素的细胞毒性可能对真核细胞造成不良的副作用，并可能促进耐药支原体菌株的发展。Mynox®是第一种生物试剂，通过诱导微生物死亡来消除支原体污染。它已经被证明是有效的，只有一个治疗。Mynox®的活性基于其生物物理特性，这使得耐药菌株的不易产生。
如何处理非薄膜病毒中污染的支原体？德国MB公司生产的Mynox细胞支原体清除，不仅能清除细胞中的支原体，对于非包膜病毒也有效。
冷冻或新鲜等量的细胞和无细胞碎片的病毒悬浮液可以处理。病毒滴度不影响治疗的成功。
3.1细胞制备及消泡液
1.使用1.5 ml带安全锁的无菌反应管配制消毒液。
2.加入1 ml不加FCS的细胞培养基。
3.加入100µl Mynox®。
4. 将含有高达8% (v/v) FCS的125µl病毒原液转移到混合物中。漩涡。包括病毒原液的处理混合物的总体积为1.225 ml。
注意:在旋转过程中，请确保消除液湿润离心机管的整个内表面。
3.2 Mynox®的处理和去除
1.在室温下将消去液孵育2小时。
2.将处理混合物在培养基中稀释1:10，停止反应。这可以通过使用消除混合物感染亚融合宿主细胞培养物以同时繁殖无支原体病毒培养物来实现。最终体积应为消泡液体积的10倍。
注意:感染前检测宿主细胞系是否受支原体污染。
如何处理非薄膜病毒中污染的支原体？德国MB公司生产的Mynox细胞支原体清除，不仅能清除细胞中的支原体，对于非包膜病毒也有效。
冷冻或新鲜等量的细胞和无细胞碎片的病毒悬浮液可以处理。病毒滴度不影响治疗的成功。
3.1细胞制备及消泡液
1.使用1.5 ml带安全锁的无菌反应管配制消毒液。
2.加入1 ml不加FCS的细胞培养基。
3.加入100µl Mynox®。
4. 将含有高达8% (v/v) FCS的125µl病毒原液转移到混合物中。漩涡。包括病毒原液的处理混合物的总体积为1.225 ml。
注意:在旋转过程中，请确保消除液湿润离心机管的整个内表面。
3.2 Mynox®的处理和去除
1.在室温下将消去液孵育2小时。
2.将处理混合物在培养基中稀释1:10，停止反应。这可以通过使用消除混合物感染亚融合宿主细胞培养物以同时繁殖无支原体病毒培养物来实现。最终体积应为消泡液体积的10倍。
注意:感染前检测宿主细胞系是否受支原体污染。