细胞培养之：如何从血清检测指标评价优质血清

牛血清是目前细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的、细胞生长必需的营养成分，具有极为重要的功能。

要保证血清质量，需要有严格的质控，包括从外观到理化性质、细胞增殖试验和微生物检查，制定一系列的标准，以及出厂产品能符合这些标准。

一、外观及相关物质含量

 

 

以胎牛血清为例，优质的特级胎牛血清，外观应是淡棕色至橙色透明液体，无颗粒物沉淀。

PH在6.7-8.2之间；

渗透压在260-340mosm/kg之间；

血红蛋白含量小于20mg/dL；

总蛋白含量在30-50g/L；

白蛋白含量在14-34g/L；

α、β、γ球蛋白含量则以实际测量为准；

IgG应小于250μg/mL；

内毒素含量应小于3EU/mL;

内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代

 

二、无菌检测

 

优质的特级胎牛血清还要经过严格的无菌检测。确保血清无污染。

检测项目包括厌氧菌、好氧菌、真菌（最容易污染细胞的酵母菌和霉菌都应包括在内）以及支原体检测。检测结果应全部为阴性，视为通过无菌检测。

 

 

三、病毒检测

 

血清含有病毒，会导致宿主细胞发生肿胀、坏死、脱壁，不仅严重影响实验进度，更可能会对实验人员造成威胁。

对于血清中的病毒检测，重点放在那些曾全世界大范围爆发、人畜共患或是十分常见的病毒身上。

每个地区的法规会有些许区别，但牛副流感3型病毒（PI-3）、牛腹泻病毒（BVD）、牛细小病毒等是任何国家和地区的检测报告中，都应标注清楚的。

一批合格的血清，所有病毒检测项目均应为阴性。

 

 

四、细胞生长情况

 

促进细胞增殖方面，也是血清一项不可忽视的指标。每一批次血清也应就克隆率、细胞毒性、细胞增殖密度、和倍增时间进行检查。

所有检测结果应符合相应的规范。

 

 

五、抗体检测

 

病毒检测反映的是动物采血时、或血清加工过程中有没有感染病毒，而抗体检测则表示该供体动物在采血前一段时间内，是否感染过病毒。

优质的特级胎牛血清，应保证动物从始至终都没有感染过相关病毒，因此检测结果应为阴性。

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