细胞培养中最重要的步骤——无菌操作

细胞实验室最常面对的难题就是：如何保持无菌。细胞一旦遭到污染,所有的实验结果都会变得毫无意义。

结细胞污染的主要原因包括：操作技术不严格、试剂质量不达标、大气中孢子计数增加、养箱或操作台使用和维护不当等。

因此，在细胞培养过程中，操作者不仅要严格遵守标准的操作程序，同时还要特别注意新产品、新品牌、以及设备的清洁维护。同时，及时检测并鉴定细胞是否被污染同样至关重要。

实验进行前，超净台以紫外灯照射 30 分钟灭菌，以 70 % ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，避免细胞间交叉污染。

实验完毕后，将实验物品带出工作台，再次以 70 % ethanol 擦拭无菌操作台面。实验用品以 70% 乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般不要再边缘区域操作。

试验台、超净台、培养箱、液氮罐、移液器、门把手、电话等细胞培养环境被支原体污染，可引起细胞的污染。应定期对工作区域进行消毒。本文缔一生物为您分析实验室工作区域中支原体祛除的方法。

常用以下三种方法：

Mycoplasma OffTM是一款支原体喷雾剂，用于清除工作区域中的支原体。它起效快（10秒钟即起效），安全无毒，对细胞不会产生不良影响，喷洒后，可再用干净纸张擦拭即可。对于工作台以及各种细胞操作的器具表面，均可使用。如果是需要避免沾染液体的电子设备，可使用Mycoplasma OffTM湿巾擦拭。

细胞孵箱、水浴锅等有温水的地方，也容易滋生支原体、细菌等。在循环水中倒入Water ShieldTM（1：200稀释）即可有效地预防滋生，效果可持续1个月左右。

Mycoplasma OffTM对许多细菌、病毒也有预防和杀灭作用。