细胞传代培养的原理及操作步骤-胎牛血清助力科研实验

细胞传代培养原理

细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。

传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

细胞传代培养具体操作

1、材料和试剂的准备

1）细胞：贴壁细胞株

2）试剂：0.25％胰酶、1640培养基（含10％小牛血清）

3）仪器和器材：倒置显微镜，培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等

2、操作步骤

1）将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。

2)加入0.5—1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中。

3)瓶口塞好橡皮塞，放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移，原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时将胰酶弃去，加入10ml培养液终止消化。

观察消化也可以用肉眼，当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。

4)用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分到另外两到三瓶中，实践培养液塞好橡皮塞，置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。

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